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BCR-647 人腺苷脱氨酶标准品制备流程

发布时间: 2025-09-28  点击次数: 144次

BCR-647 人腺苷脱氨酶标准品是欧盟 ERM(原 BCR)体系下针对人腺苷脱氨酶(Adenosine Deaminase, ADA) 检测设计的冻干型酶活性标准品,核心定位为临床生化检测的量值溯源载体与方法验证标准。其原料源自人源重组 ADA 蛋白,经纯化、定量后以 0.5mg / 支的西林瓶包装供应,复溶后可获得浓度为 1.0mg/mL 的标准溶液,适配临床实验室常规检测批次需求。


BCR-647 人腺苷脱氨酶标准品的核心特征在于酶活性量值精准且稳定,根据 ERM 官l方定值报告,其酶活性参考值为 125±8 U/mg 蛋白(37℃,pH 7.5 条件下) ,蛋白纯度经 SDS-PAGE 验证>98%,无杂酶活性干扰(腺苷激酶残留<0.01 U/mg),为临床 ADA 检测(正常参考范围 2.2~17U/L)的方法校准提供可靠基准。


BCR-647 人腺苷脱氨酶标准品标准化制备流程 

蛋白表达与纯化:将人 ADA1 基因克隆至 pET-28a 载体,大肠杆菌 BL21(DE3)表达后,经 Ni-NTA 亲和层析(纯度>95%)、凝胶过滤层析(Superdex 200)精制,去除聚合体; 

冻干工艺:采用分步冷冻法(-40℃预冻 2h,真空度 10Pa 升华干燥 12h),添加 5% 甘露醇作为保护剂,维持酶活性回收率>95%; 

分装与质控:无菌环境下分装至西林瓶,每批次随机抽取 10 支进行均匀性检验(活性 RSD<2%),稳定性考察显示 - 20℃储存 24 个月活性衰减<5%。


东莞市百顺生物科技有限公司专业提供BCR-647 人腺苷脱氨酶标准品,欢迎咨询定购。

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